Facultad de Medicina Virtual

Dr. Hugo Molina, Jefe de la División Neuropatología
Dra. Nancy Pérez, Médica de Staff
Ht. Claudio Núñez, Técnico Especializado

FUNCIONAMIENTO Y OBJETIVOS 

La División de Neuropatología consiste en un grupo de recursos humanos e infraestructurales dedicado al estudio morfológico, inmunohistoquímico, histoquímico, histoenzimológico, ultraestructural y molecular de las muestras celulares y tisulares provenientes de pacientes de casos clínicos humanos y de material de investigación experimental.

El funcionamiento consiste en la recepción de las muestras, procesamiento adecuado (más abajo detallado, según el espécimen) su examen y elaboración diagnóstica.

El objetivo es el de llegar a una conclusión diagnostica basada en todas las evidencias obtenidas en los diferentes procesamientos aplicados al espécimen investigado.

SUBDIVISIONES 

Las subdivisiones se realizan en sectores de laboratorios que se dedican a un área determinada en la investigación de las muestras realizadas en la División.

a. Histopatología clásica y especial. Consiste en el procesamiento clásico de fijación en formol o etanol de las muestras, deshidratación, inclusión en parafina y cortes coloreados con H.E. (Hematoxilina y Eosina) y técnicas especiales.

Ejemplos:

H.E., PAS, RETICULINA, TRICROMICOS, ROJO CONGO, ZIELH-NIELSEN, GROCOTT ETC.

Sustancia gris cerebral normal, observe el neuropilo o fondo constituido por las prolongaciones celulares, las neuronas grandes con núcleos voluminosos y nucleolos prominente, los oligodendrocitos con sus núcleos mas pequeños, redondos, hipercromáticos y halo claro perinuclear, astrocitos con núcleos mas grandes y cromatina laxa, microglia con núcleos elongados y capilares con núcleos de endotelios elongados y glóbulos rojos en su interior. HE 400x.

Corte a nivel del bulbo con coloración para mielina, se halla arriba el piso del IV ventrículo y abajo ambas olivas bulbares con sus estructuras ondulantes blanquecinas por ser sustancia gris.  Mielina 25x.

b. Histoquímica e histoenzimología, mas usada en estudios de tejido muscular estriado, se aplican a un amplio espectro de investigaciones de diferentes tipos de patologías.

Ejemplos:

MÚSCULO Y OTROS TEJIDOS: CONGELACION EN ISOPENTANO / NITROGENO LIQUIDO - CORTES EN CRIOSTATO  - 

TECNICAS HISTOLOGICAS, HISTOQUIMICAS E HISTOENZIMOLOGICAS:

01.  HEMATOXILINA-EOSINA

02.  PA-SCHIFF

03.  GOMORI (ENGEL & CUNNINGHAM)

04.  OIL RED

05.  MIOFOSFORILASA

06.  NADH

07.  SUCCINICO DESHIDROGENESA (SDH)

08.  FOSFOFRUCTOKINASA

09.   ATPasa pH 9.4

10.  ATPasa pH 4.6

11.  ATPasa pH 4.2

12.  ESTERASA INESPECIFICA

13.  FOSFATASA ALCALINA

14.  FOSFATASA ACIDA

15.  CITOCROMO C OXIDASA

16.  LACTICODESHIDROGENASA (LDH)

Histoenzimología aplicada para la detección de NADH (izquierda) donde se observan fibras azules violáceas y para ATPasa pH 9.4 (derecha) de coloración marrón. En ambos casos hay fibras claras y oscuras, fibras tipo 2 (claras, a la izquierda), fibras tipo 2 (oscuras, a la derecha); en ambos casos son pequeñas indicando el diagnostico de atrofia selectiva de fibras tipo 2, en este caso por anoxia perinatal y daño cerebral central en niño hipotónico de 1 año.  NADH, ATPasa 400x.

c.  Inmunohistoquímica, con sus diversos métodos es aplicada a estudios de biología, embriogénesis, patología tumoral y patología clínica así como también a la investigación de la integridad de proteínas de membranas en enfermedades neuromusculares.

Ejemplos:

·Aplicaciones generales

i. Inmunohistoquímica para la detección de antígenos tumorales del SNC, GFAP, S-100, NF, SINAPTOFISINA

ii. Inmunohistoquímica aplicada a la detección de otros tumores que asientan en el SNC.

iii. Detección de antígenos indicadores de enfermedades clínicas del SNC.

iv. Marcadores de proliferación de células tumorales y de receptores hormonales.

v. Marcadores de antígenos de agentes microbiológicos que afectan al SNC.

Aplicaciones en Patología Hipofisaria

1.   Fijación en etanol - inclusión en parafina - cortes seriados - HEMATOXILINA-EOSINA - PAS - ORANGE G

2.  Inmunoperoxidasa con técnica de ABComplex para la detección de las siguientes hormonas:  GH, PRL, ACTH, FSH, LH y TSH.

Inmunomarcación con peroxidasa de tejido  adenohipofisario normal en corte seriado, a la izquierda se ven células grandes coloreadas para ACTH y a la derecha las mismas células negativas y positividad en otras células más pequeñas para prolactina.  250x.

Inmunomarcación para ACTH en  adrenocorticotropinoma difuso funcionante intenso para la hormona en alto porcentaje de células.  400x

· Aplicaciones en Patología Muscular

TECNICAS DE ABComplex PARA LA INVESTIGACION DE PROTEINAS DE MEMBRANA: DISTROFINA (dys1, dys 2, dys3), ESPECTRINA (SPEC1), SARCOGLICANOS:  ALFA (a-SARC), BETA (b-SARC), DELTA (d-SARC), GAMMA (g-SARC), DISTROGLICANO (d-DG),  Y MEROSINA.

Inmunomarcación con técnica de ABCcomplex para la detección de la proteína de membrana “distrofina” en el músculo de paciente con distrofia de Duchenne, donde falta la misma. Observe las fibras redondeadas con borde o membrana celeste (ausencia) y solo una fibra en un extremo y 2 con reborde apenas coloreado de marrón debido a que poseen escasa proteína.  Distrofina 400x.

 d. Nervios periféricos, la aplicación adecuada y necesaria de las técnicas para el estudio de las enfermedades de nervios periféricos.

Ejemplos:

1.  FIJACION EN GLUTARALDEHIDO - INCLUSION EN PARAFINA - CORTES TRANSVERSALES Y LONGITUDINALES SERIADOS - HEMATOXILINA - EOSINA  -  PA-SCHIFF -  ROJO CONGO (M. LUZ POLARIZADA)  -  ZIELH-NIELSEN – TETROXIDO DE OSMIO (MIELINA)

2.  DISECCIÓN DE AXONES AISLADOS

3.  INCLUSIÓN EN PLASTICO, EXAMEN OPTICO Y MICROSCOPIA ELECTRONICA

Corte transversal de nervio de ratón crónicamente infectado por T. cruzi.  Azul de toluidina 400x

e.  Patología Molecular. Aplicación de otras técnicas como hibridización in situ, etc para el estudio de la biología de las lesiones.

f.  Microscopia Electrónica. Aplicación del estudio ultraestructural en los casos que lo requieran para su diagnostico. 

Microscopia electrónica, corte longitudinal de músculo esquelético normal, con todas sus estructuras preservadas

ACTIVIDADES DE INVESTIGACIÓN 

a.  Efectos histopatológicos de la inyección de ozono diluido en oxigeno a diferentes concentraciones en discos intervertebrales de porcinos.

b.  Estudio epidemiológico de la incidencia de adenomas hipofisarios en nuestro medio.

c.  Investigación de posibles factores pronósticos de adenomas hipofisarios, por inmunodetección de diferentes antígenos.

d.  Forma pseudotumoral de infección encefálica por T. cruzi en pacientes con SIDA y otras inmunodeficiencias.

CONSULTAS 

División de Neuropatología del Instituto de Neurociencias Aplicadas.
Piso 9º. Secretaría del Instituto de Neurociencias Aplicadas. Hospital de Clínicas “José de San Martín”.
Lunes a viernes.
Horario: 8ºº–13ºº hs.
Tel: 5950-9044
Dr. Hugo Molina
E-mail: humolina@fibertel.com.ar